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大小鼠脊髓模具的規(guī)范操作方法分享
大小鼠脊髓模具是一種專用于神經(jīng)科學研究中脊髓組織精準定位、固定與切片制備的實驗輔助工具，廣泛應用于脊髓損傷、神經(jīng)退行性疾病及藥物干預等動物模型研究。其通過標準化槽道設計，確保脊髓在灌注、取材、冰凍或石蠟包埋過程中保持解剖完整性與空間一致性，從而提升組織切片質量與實驗可重復性。掌握大小鼠脊髓模具科學、規(guī)范的操作方法，是實現(xiàn)準確的關鍵。
一、使用前準備
清潔模具：使用前以75%乙醇擦拭或超聲清洗，去除殘留組織或固定液，避免交叉污染；
預冷處理：冰凍切片用模具需提前置于–20℃冰箱或干冰上預冷，防止組織融化；
匹配規(guī)格：根據(jù)實驗動物種類選擇對應模具——小鼠模具槽道長約3–4cm，大鼠約4–5cm，直徑適配胸腰段脊髓（小鼠Φ1.5–2mm，大鼠Φ2.5–3mm）。
二、脊髓取材與置入規(guī)范
動物經(jīng)心臟灌注生理鹽水及4%多聚甲醛后，迅速取出整段脊柱，置于冰冷PBS中；
在解剖顯微鏡下小心剝離椎骨，完整取出脊髓，避免牽拉或擠壓；
將新鮮或固定后的脊髓輕柔置入模具中央槽道，確保頭尾方向一致，無扭曲或折疊。
三、包埋與固定操作
冰凍切片：注入OCT包埋劑至沒過脊髓，傾斜緩慢排除氣泡，–80℃速凍；
石蠟切片：將模具連同脊髓轉入脫水梯度，再浸蠟包埋，確保組織與蠟充分融合；
包埋過程中可用細針輕壓脊髓，使其貼合槽底，防止漂浮偏移。
四、脫模與切片要點
冰凍塊從模具中輕敲脫出，若粘連可短暫回溫1–2秒；
切片時使脊髓橫斷面垂直于刀片，確保獲得標準橫切面；
對縱切實驗，可選用帶縱向槽道的專用模具，或旋轉90°放置脊髓。
五、使用后維護
切勿用金屬器械刮擦模具內(nèi)壁，以免劃傷影響后續(xù)組織貼合；
OCT殘留可用溫水浸泡軟化后沖洗，石蠟殘留用二甲苯溶解；
干燥后存放于潔凈盒中，避免灰塵沉積。
